Penggunaan Alat Pelindung Diri (APD) merupakan tahap akhir dari metode pengendalian kecelakaan maupun penyakit akibat kerja. Meskipun demikian, penggunaan APD akan menjadi sangat penting apabila pengendalian secara teknis dan administratif telah dilakukan secara maksimal namun potensi resiko masih tergolong tinggi. Keefektifan penggunaan alat pelindung diri (APD) terbentur perilaku dari para tenaga kerja itu sendiri.Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui seberapa besar hubungan pengetahuan dan masa kerja dengan perilaku penggunaan APD di RSIA Setya Bhakti Cimanggis Depok Tahun 2013.Penelitian ini menggunakan metode deskriptif analitik dan pendekatan cross sectional, analisis yang digunakan yaitu analisis korelasi.Populasi dalam penelitian ini adalah seluruh pekerja di RSIA Setya Bhakti yang berjumlah sebanyak 40 orang. Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa adanya hubungan antara pengetahuan dengan perilaku penggunaan alat pelindung diri (APD) dengan hasil p value = 0,030. Sedangkan masa kerja tidak ada hubungan dengan perilaku penggunaan alat pelindung diri (APD) dengan hasil p value = 0,225 dan sikap ada hubungan dengan perilaku penggunaan alat pelindung diri (APD) dengan hasil p value = 0,005 Saran yang diajukan untuk meningkatkan penggunaan APD pada pekerja dengan cara pendekatan, sosialisasi, serta peningkatan pengetahuan dan pemahaman tentang manfaat, fungsi dari penggunaan alat pelindung diri (APD). Kata Kunci : Alat Pelindung Diri, Pengetahuan, Masa Kerja dan Perilaku. Data Acuan : 23 (2008 - 2013).